細胞因子，是一類由免疫細胞和某些非免疫細胞（內皮細胞、表皮細胞、纖維母細胞等）在受到刺激后合成和分泌的小分子蛋白質，具有廣泛的生物學活性，通過結合相應受體，調控細胞生長、分化、凋亡、傷口愈合、信號轉導和穩(wěn)態(tài)平衡。研究細胞因子為臨床上疾病的預防、診斷、機理研究以及治療奠定了堅實基礎，其應用前景廣泛。那么你知道細胞因子檢測的常見免疫學技術有什么嗎？讓我們一起來看看吧！

　　一、傳統Western Blot

　　傳統蛋白質免疫印跡法（Western Blot，WB）是一種常見的蛋白質免疫分析技術，被應用于確認特定蛋白質的存在并進行定性和半定量分析。WB實驗基于抗原抗體特異性反應，經過SDS-PAGE分離蛋白質后，將其轉移到硝酸纖維素薄膜（NC）或聚偏二氟乙烯膜（PVDF）。隨后，使用脫脂牛奶封閉液進行封閉，一抗稀釋液進行孵育。蛋白質與抗體結合后，通過洗滌去除未結合的一抗，接著加入酶標記或者熒光標記的二抗。最后，利用化學發(fā)光液或者特定的激發(fā)光源，對靶蛋白進行檢測，可以通過膠片、化學發(fā)光儀或熒光成像儀進行成像，最終捕捉到蛋白條帶。

　　二、全自動毛細管Digital Western

　　作為創(chuàng)新性毛細管電泳免疫學技術，全自動毛細管Digital Western（也稱Simple Western）將Western Blot技術和ELISA技術合二為一，具備傳統WB蛋白質可視化定性優(yōu)勢，同時具備ELISA免疫學實驗精準定量能力，其靈敏度和精密度符合高標準生物分析要求，可利用超微量樣本實現內源性蛋白質精準定量。自動化規(guī)避了傳統WB和SDS-PAGE勞動密集型操作引入的人為誤差。僅需要微量樣本（3μL）即可實現多重蛋白質表達檢測，節(jié)約珍貴樣品，

　　三、傳統ELISA

　　酶聯免疫吸附測定法是一種常用的免疫測定方法，通常用于定量檢測樣本中目的蛋白的水平。利用ELISA檢測的樣本包括血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、細胞裂解物、唾液、組織裂解物和尿液。ELISA通常在96孔板中進行，孔板中包被有一種捕獲特定分析物的抗體。在與實驗樣本、標準品或對照品孵育后，目標分析物將被這種抗體捕獲。隨后使用結合到目標分析物不同抗原表位的檢測抗體完成"夾心"結構。接著加入底物溶液，產生的信號與結合的分析物量成比例。ELISA有不同形式，包括直接法ELISA、間接法ELISA、夾心法ELISA和競爭法ELISA。

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